昨天下午15時(shí)，貴陽醫(yī)學(xué)院杜老師致電我司何咨詢ELISA相關(guān)技術(shù)。還記得上月中旬，杜老師在我公司購買了大鼠白介素6試劑盒，售后反應(yīng)非常好，這次來電向我公司何主要咨詢的是ELISA檢測交叉反應(yīng)。
如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的特異性，其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個(gè)因素。在何與客戶交流ELISA交叉反應(yīng)的過程中，何說道：“盡管現(xiàn)在購買源自動(dòng)物的抗體越來越容易，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測時(shí)，檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合，實(shí)驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗，來避免上述問題。"
如今檢測ELISA有許多途徑，我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)具有特征性的顏色，可以通過分光光度計(jì)進(jìn)行檢測，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上，也可以結(jié)合在二抗上，還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。此外ELISA的結(jié)果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。
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