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      血漿游離血紅蛋白測定

      更新時間:2012-10-15   點擊次數:3028次

      血漿游離血紅蛋白實驗原理  

       血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色zui終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。

      實驗方法

        材料:
        1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液
        2.1%H2O2
        3.10%醋酸溶液
        4.分光光度計
        方法:
        1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
        2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。

      試劑 (ml)
      測定管
      空白管
      2 g/L鄰甲聯苯胺溶液
      0.5
      0.5
      患者血漿
      0.02
      /
      1% H2O2
      0.5
      0.5
      混勻后室溫放置10min
      10%醋酸溶液
      5.0
      5.0
      室溫放置10min

        3.計算公式
        血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
      實驗結果計算
        參考范圍:0-40mg/L
      注意事項
        1.一切容器避免血紅蛋白污染;
        2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
        3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
        4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確。

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